Elisa 生物檢測(cè)是一種實(shí)驗(yàn)性診斷方法，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。 因其試劑穩(wěn)定、易于儲(chǔ)存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷客觀等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢測(cè)的各個(gè)領(lǐng)域。 ELISA檢測(cè)試劑盒適用于人血清或血漿中抗人戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)的體外定性檢測(cè)。

中文名稱ELISA試劑盒

外文名ELISA試劑盒

發(fā)表于 60 年代和 70 年代

特點(diǎn)：試劑穩(wěn)定、易儲(chǔ)存、易操作。

操作方法

雙抗體夾心法

1. 包被：以 0.05 MPH 稀釋抗體至蛋白質(zhì)含量為 1-10 μg/ml。 9.含氧碳酸鹽涂層緩沖液。在 4°C 下將 0.1 ml 添加到每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中過夜。次日，棄孔中溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，每次3分鐘。 （以下也稱為清掃）。

2、加樣：向上述包被好的反應(yīng)液中加入0.1ml的特定稀釋待測(cè)樣品，37℃孵育1小時(shí)。然后洗。 （同時(shí)創(chuàng)建空白孔、陰性對(duì)孔和陽(yáng)性對(duì)照孔）。

3. 酶標(biāo)抗體的加入：每個(gè)反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（滴定后稀釋）0.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小時(shí)并洗滌。

4、加入底物溶液顯色：在每個(gè)反應(yīng)孔中加入0.1ml臨時(shí)配制的TMB底物溶液，37℃孵育10-30分鐘。

5. 反應(yīng)結(jié)束：向每個(gè)反應(yīng)孔中加入 0.05 ml 2M 硫酸。

6、結(jié)果的判斷：在白色背景上可以用肉眼直接觀察結(jié)果。反應(yīng)孔越深，陽(yáng)性反應(yīng)越強(qiáng)，陰性反應(yīng)無(wú)色或非常淺。表示“-"符號(hào)。您還可以測(cè)量 OD 值。用ELISA檢測(cè)器在450nm（ABTS顯色時(shí)為410nm），用空白對(duì)照孔調(diào)零，如果大于OD值的2.1倍，測(cè)量各孔的OD值。的陰性對(duì)照為陽(yáng)性。

間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；

4.（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.’最后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

可概括四個(gè)方面：

1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

2、研究抗酶抗體的合成。

3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。

4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。

同產(chǎn)品展示：