能夠應(yīng)用ELISA 實(shí)驗(yàn)的樣本種類很多,有血清,血漿,細(xì)胞上清,細(xì)胞裂解液,尿液,關(guān)節(jié)滑液,腦脊液,肺泡灌洗液,各種組織的組織勻漿﹔采集和處理的方式都不相同。根據(jù)我司技術(shù)員對(duì)ELISA試劑盒血清標(biāo)本的防范有以下幾點(diǎn)建義。
1. ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所排泄的一些酶也許會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果。樣本的長(zhǎng)期保留,應(yīng)在-70C以下。
2. ELISA試劑盒血清標(biāo)本是以無(wú)菌操作別離,則能夠在2~8C下保留一周,有菌操作,則主張冰凍保留。要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過(guò)氧化物的活性。在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過(guò)氧化物的活性.在以HRP為符號(hào)酶血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相,然后與后邊加入的HRP底物反應(yīng)顯色.
3.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的剪切將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
4.在保存標(biāo)本中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)